Tartalom
- szakaszában
- 1. módszer Közvetlenül figyelje meg a baktériumokat
- 2. módszer A biomassza mérése
- 3. módszer Turbidimetriával végezzük
A baktériumok növekedésének mérésére számos módszer létezik, és néhányat nehezebb megvalósítani, mint másokban. A legegyszerűbbet általában használják, és viszonylag pontos eredményeket adnak, feltéve, hogy szigorúak a mérések során. A leggyakoribb technikák a baktériumok megfigyelése és számlálása, a biomassza és a száraz biomassza mérése és a turbidimetria. Iskolai laboratóriumának rendelkeznie kell az ezen módszerek legalább egyikéhez szükséges felszereléssel.
szakaszában
1. módszer Közvetlenül figyelje meg a baktériumokat
-
Készítse elő a felszerelést. Amellett, hogy általában megtalálható az összes biológiai laboratóriumban, szüksége lesz néhány speciális elemre. Győződjön meg arról, hogy kéznél van minden eszköz és tartály kéznél, így nem kell oda-vissza odamennie a szekrénybe, ahol a felszerelést tárolja. Gondoljon előre, hogy mit fog tenni, hogy megtudja, mit fog használni az egyes szakaszokban. Önnek ismernie kell néhány kulcsfontosságú kifejezést.- Szerezzen hemacytométert. Ez egy számlálókamrákkal ellátott penge, amely a mikroszkóphoz van társítva. Ez egy nagyon egyszerű eszköz a beállításhoz és a használathoz. Az iskolák és kutatólaboratóriumok felszerelésére szakosodott beszállítókat találhat. Általában egy felhasználói kézikönyvet kapnak.
- Vegyünk egy Petri-csészét. Ez egy kicsi, kerek, sekély tartály, ahol meg lehet figyelni a baktériumokat.
- A "tenyészet" kifejezés olyan mikroorganizmusra utal, amelyet egy tudományos kísérlet részeként mesterségesen szaporítanak.
- A "kultúra táptalajja" az a közeg, amelyben a kultúra fejlődik.
-
Használja a Petri-csészét. Helyezze a baktériumokat a dobozba, és mikroszkóp alatt figyelje meg. Ezenkívül közvetlenül a diára is helyezheti. Ezután számoljuk meg a baktériumsejtek számát. -
Ellenőrizze, hogy megfelelő-e a koncentráció. Ha túl sok baktérium van, átfedésben vannak, és nem fogja tudni őket helyesen megszámolni. Ebben az esetben hígítsa a tenyészetet egy kevés leves keverésével. Ha túl kevés van, az eredmény nem lesz jelentős. Ezután a levest szűrnie kell a koncentráció növelése érdekében. -
Számoljuk meg a baktériumokat. Az utolsó lépés egyszerűen számolni. Nézze meg a mikroszkóp alatti számlálókamrákat, és jegyezze fel a látható sejtek számát. Hasonlítsa össze az eredményt más hasonló tapasztalatokkal.
2. módszer A biomassza mérése
-
Ellenőrizze, hogy rendelkezik-e a szükséges műszerekkel. Ez a módszer lassan valósul meg, és drága berendezések használatát foglalja magában. Ha nem mossa le, akkor használjon másik technikát. Másrészt, ha a laboratóriumban vannak megfelelő eszközök, akkor a biomassza és a száraz tömeg mérése ideális, mivel pontos eredményeket ad. Szüksége van:- kényszerkonvekciós hidraulikus sütő,
- egy alumínium mérlegtálca,
- több Erlenmeyer-lombik,
- centrifuga vagy laboratóriumi szűrőrendszer.
-
Ellenőrizze, hogy a termés Erlenmeyer-lombikban van-e. Ha nem erről van szó, öntse be. A kísérlet ezen szakaszában a baktériumok még mindig a tenyésztő táptalajban vannak. Később elválasztják őket. -
Szárítsa meg a mérőpoharat. Ehhez tegye a sütőbe. Használhat egy 47 mm átmérőjű cellulóz-acetát membránszűrőt is, 0,45 μm pórusokkal. Bármelyik szerszámot is használják, mérje meg pontosan annak tömegét, hogy le lehessen vonni az eredményekből, amelyeket akkor kap, amikor a növényt ráhelyezik. -
Mix. Keverjük össze a lerlenmeyer-t úgy, hogy a tenyészet homogén legyen. Valójában a gravitáció miatt a sejtek természetesen hajlamosak a tartály aljára esni. Tehát egy kicsit meg kell ráznia, amelyek eloszlása egyenletes módon történik, és hogy a mintája reprezentatívabb legyen. -
Centrifugában. A centrifuga segítségével szüntesse meg a baktériumokat a tenyészlevestől. Ezt az eszközt a tartály és az ellensúly elforgatására használják nagyon nagy sebességgel. A húsleves folyik, amely csak az élő anyagokat tartja fenn. További információt a centrifuga használatáról az interneten talál. -
Hozd a tésztát. Dobja el a mérlegre. A kultúralevest eldobhatja, már nincs rá szüksége, de tartsa kéznél a lerlenmeyer-t. -
Öblítsük le a centrifugát. Öntsön az öblítővizet a mérlegfelületre a baktériumsejtek mellett. A mindent elért eredmény megadja neked a biomasszát. -
Keresse meg a száraz tömeget. A minta száraz biomasszajának megismeréséhez helyezze a mérlegtét a kemencébe 100 ° C-ra beállított hőmérsékleten 6–24 órán keresztül, a készülékhez mellékelt utasítások szerint. Vigyázzon, ne lépje túl ezt a hőmérsékletet, hogy elkerülje a baktériumok égését. Ezután mérje meg mindent, majd vonja le a tálca tömegét.
3. módszer Turbidimetriával végezzük
-
Készítse elő a felszerelését. Szüksége lesz fényforrásra és spektrofotométerre, a legtöbb tudományos laboratóriumban található eszközre. Lásd a mellékelt felhasználói kézikönyvet, mivel minden modellnek megvan a saját működése. Ez a módszer az egyik leggyakrabban használt baktériumszaporodás mérésére, mivel csak olcsó és könnyen használható eszközökre van szükség. -
Hozz fényt a kultúrába. A turbiditást a részecskék folyadéktartalmának felmérésére használják, ez azt jelenti, hogy meghatározzák-e a folyadék többnyire zavaros. A mérésből kapott eredményt NTU-ban (vagy nephelometrikus zavarosság mértékegységben) adják meg. A minta zavarosságának pontos mérése érdekében szükség lehet az eszköz kalibrálására. -
Jegyezzen fel. A zavarosság a mintában lévő baktériumok mennyisége. A spektrofotométer segítségével megismerheti az oldat transzmittanciáját (% T), amelynek értéke fordítottan arányos a zavarossággal. Ezután hasonlítsa össze a különféle mintákon kapott eredményeket a baktériumok növekedésének mérésére.